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高中生物實(shí)驗(yàn)：班氏試劑的配制與鑒定結(jié)果

取無水硫酸銅1.47g,溶于100ml熱水中，冷卻后稀釋到150ml，取檸檬酸鈉173g，無水碳酸鈉100g和600ml水共熱，溶后冷卻并加水至850ml，再將冷卻的150ml硫酸銅傾入即可。

鑒定糖尿的結(jié)果

沸水浴加熱后的現(xiàn)象　　　　　　 　　葡萄糖含量(g/dl)

透明藍(lán)色　　　　　　　　　　　　　　　　　　無

加熱時(shí)無變化，僅冷卻后有少量沉淀　　　　微量，約0.5以下

加熱1分鐘后即出現(xiàn)少量黃綠色沉淀　　　　少量，約0.5-1

加熱10-15秒后即出現(xiàn)土黃色沉淀　　　　　中量，約1-2

加熱時(shí)很快出現(xiàn)多量磚紅色沉淀　　　　　　大量，約2以上

班氏試劑與斐林試劑比較：

首先，兩者的配方不一樣。斐林試劑主要由質(zhì)量濃度為0.1g·mL-1的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為0.05g·mL-1的CuSO4溶液配制而成。其中0.1g·mL-1的NaOH溶液稱為斐林試劑甲，0.05g·mL-1的CuSO4溶液稱為斐林試劑乙。而班氏試劑的配方為：①400mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無水碳酸鈉;②50mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅，制成CuO4溶液;③把CuSO4溶液倒入檸檬酸鈉?Na2CO3溶液中，邊加邊攪，如產(chǎn)生沉淀可濾去。

其次，兩者在反應(yīng)原理上略有差別。利用斐林試劑鑒定時(shí)，斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應(yīng)產(chǎn)生Cu(OH)2，Cu(OH)2和可溶性還原糖反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀。而班氏試劑中Cu(OH)2的產(chǎn)生卻是這樣的：檸檬酸鈉和碳酸鈉均為強(qiáng)堿弱酸鹽，在水中它們均可水解產(chǎn)生OH-，與檸檬酸鈉?Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合時(shí)，Cu2+和OH-結(jié)合，生成Cu(OH)2，Cu(OH)2與葡萄糖中的醛基反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀。

第三，兩種試劑的保存方式不同。斐林試劑甲和斐林試劑乙可強(qiáng)烈反應(yīng)產(chǎn)生Cu(OH)2，Cu(OH)2很容易沉淀析出，因此斐林試劑一般為現(xiàn)用現(xiàn)配;而班氏試劑的配方中，檸檬酸鈉?Na2CO3為一對緩沖物質(zhì)，產(chǎn)生的OH-數(shù)量有限，與CuSO4溶液混合后產(chǎn)生的Cu(OH)2濃度相對較低，不易析出，因此該試劑可長期保存。

無論利用班氏試劑還是斐林試劑，歸根結(jié)底都是Cu(OH)2與醛基反應(yīng)而生成磚紅色的Cu2O沉淀，因此兩者反應(yīng)現(xiàn)象一樣25v;

可溶性還原糖的鑒定：

生物組織中普遍存在的可溶性糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖。葡萄糖、果糖和麥芽糖的分子內(nèi)含有醛基，醛基具有還原性，可與弱氧化劑反應(yīng)。與醛基有特定顏色反應(yīng)的化學(xué)試劑可用來鑒定這三種糖的存在。

(1) 利用斐林試劑：斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/mL的Na0H溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/mLL的CuS04溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍(lán)色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2在加熱條件下與醛基反應(yīng)，被還原成磚紅色的Cu2O沉淀，醛基則被氧化為羧基�？梢娪渺沉衷噭┲荒荑b定還原性糖，不能鑒定可溶性的非還原性糖。用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí)，溶液的顏色變化過程為：淺藍(lán)色→棕色→磚紅色(沉淀)。

(2)利用班氏試劑：班氏試劑由A液(硫酸銅溶液)，B液(檸檬酸鈉和碳酸溶液)配制而成。將A溶液傾注人B液中，邊加邊攪，如有沉淀可過濾。實(shí)驗(yàn)原理與斐林試劑相似，所不同的是班氏試劑可長期使用。

(3) 利用銀氨溶液：銀氨溶液是在2%的AgNO3溶液中逐滴滴人2%的稀氨水，至最初產(chǎn)生的沉淀恰好溶解為止，這時(shí)得到的溶液就是銀氨溶液。銀氨溶液中含有 Ag(NH3)20H(氫氧化二氨合銀)，這是一種弱氧化劑，能把醛基氧化成羧基，同時(shí)Ag+被還原成金屬銀。還原生成的銀附著在試管壁上，形成銀鏡�？梢姡�銀鏡反應(yīng)也可用于鑒定可溶性還原糖。鑒定的結(jié)果是出現(xiàn)銀鏡。

2.用班氏試劑鑒定可溶性還原糖，比用斐林試劑更簡便。

斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，否則實(shí)驗(yàn)難以得到滿意結(jié)果，因?yàn)榇朔磻?yīng)利用的是斐林試劑中的Cu(OH)2產(chǎn)物作為弱氧化劑參與與還原糖的反應(yīng)，而我們知道，Cu(OH)2是一種沉淀物質(zhì)，放置過久沉淀過多則不利于反應(yīng)，而班氏試劑是斐林試劑的改良，它利用檸檬酸作為Cu2+的絡(luò)合劑，使溶液穩(wěn)定、靈敏度高且可以長期使用，故更簡便。

3.利用斐林試劑或班氏試劑可以進(jìn)行尿糖檢測。

實(shí)驗(yàn)原理 尿液中葡萄糖屬可溶性還原糖，可以用班氏試劑或斐林試劑檢驗(yàn)。

材料器具 人體新鮮尿液，試管，酒精燈，試管夾，火柴，滴管，班氏試劑。

步驟

(1)在試管中加入1mL班氏試劑，加熱到沸騰，如不變色，則可使用。

(2)再在試管中滴人2滴新鮮澄清的尿液，搖勻。

(3)加熱上述混合液到沸騰，并持續(xù)2min～3min。

(4)觀察試管內(nèi)混合液顏色是否發(fā)生變化，是否有沉淀物產(chǎn)生，并按表5提示作出判斷記錄。

混合液現(xiàn)象 —記錄符號 含糖量

混合液呈藍(lán)色或藍(lán)灰色 - 0.02g/100mL

出現(xiàn)淺黃綠色沉淀 + (0.1～0.5g)/100mL

出現(xiàn)黃綠色沉淀 ++ (0.5～1.4g)/100mL

出現(xiàn)黃色沉淀 +++ (1.4～2.0g)/100mL

出現(xiàn)橘黃色沉淀 ++++ 2.0g/100mL

注意事項(xiàng)：

(1)班氏試劑和尿液混合液的體積比例應(yīng)為10：1。

(2)如是糖尿病人，檢驗(yàn)前兩三天最好停止服藥。