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摘要：轉(zhuǎn)基因豬的研究是一項(xiàng)復(fù)雜的系統(tǒng)工程。本文簡(jiǎn)要介紹了基因轉(zhuǎn)移的方法，并綜述了轉(zhuǎn)基因技術(shù)在豬的生產(chǎn)性能改良、抗病、非常規(guī)畜牧產(chǎn)品的生產(chǎn)及器官移植等方面的研究進(jìn)展情況。

關(guān)鍵詞：豬；轉(zhuǎn)基因；抗病育種；生物反應(yīng)器

中圖分類號(hào)：S828．2;文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A;文章編號(hào)：0529-5130（2002）05-0040-03

轉(zhuǎn)基因技術(shù)就是把某一動(dòng)物的特殊基因從動(dòng)物細(xì)胞中分離出來(lái)，然后把它再轉(zhuǎn)移到另一種動(dòng)物的細(xì)胞里，并使該動(dòng)物獲得前者的遺傳特性，從而改造動(dòng)物品種，獲取人類所需的特殊物質(zhì)。由于豬在解剖、組織、生理和營(yíng)養(yǎng)代謝等方面與人類最為相近，因此國(guó)內(nèi)外科學(xué)家紛紛將目光瞄準(zhǔn)了轉(zhuǎn)基因豬的研究。目前，主要研究集中于：（1）通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)提高豬的生產(chǎn)性能，增強(qiáng)抗病力，最終育成滿足人們需要的高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病新品種。1994年，德國(guó)成功培育出轉(zhuǎn)入生長(zhǎng)素的轉(zhuǎn)基因豬，使世界上出現(xiàn)了壯如小牛的"超級(jí)豬"。（2）通過(guò)建立人類疾病的轉(zhuǎn)基因豬動(dòng)物模型，揭示人類疾病的發(fā)病過(guò)程、機(jī)理及探索治療途徑。（3）把轉(zhuǎn)基因豬作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)稀有的、用其他方法不易得到的、有生物活性的人類藥用蛋白，這方面的研究最具誘惑力和商業(yè)價(jià)值。1991年美國(guó)DNA公司成功獲得了能生產(chǎn)人血紅蛋白的轉(zhuǎn)基因豬。通過(guò)這些能高效表達(dá)的轉(zhuǎn)基因豬來(lái)提供大量安全、廉價(jià)的血紅蛋白，既可節(jié)約醫(yī)藥費(fèi)，又能避免使用過(guò)期、有傳染性（如肝炎、艾滋病等）的血液。（4）利用轉(zhuǎn)基因豬生產(chǎn)人體器官，為人體器官移植提供供體。本文就轉(zhuǎn)基因豬的研究進(jìn)展作一綜述。

外源基因的導(dǎo)入方法:目前基因轉(zhuǎn)移的方法很多，但獲得大量轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的成功例子不多。

1.1DNA顯微注射法:在轉(zhuǎn)基因豬的研究中，顯微注射法是最主要的方法之一。其基本原理是用精細(xì)的顯微注射針將外源基因直接注入豬受精卵的雄原核，使外源基因整合到動(dòng)物的基因組，從而獲得轉(zhuǎn)基因豬。該方法的優(yōu)點(diǎn)是基因?qū)�入確實(shí)可靠，基因用量很省。缺點(diǎn)是成功率低，一般為1％～2％。因此，許多研究者分別從基因構(gòu)件的設(shè)計(jì)、顯微注射各技術(shù)環(huán)節(jié)的改進(jìn)與完善等方面進(jìn)行研究，以期提高生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因自的效率［1］。

1．2扎刺法:這個(gè)方法在顯微注射法定量注射困難的基礎(chǔ)上研究出來(lái)的。日本學(xué)者首先在培養(yǎng)細(xì)胞上選用扎刺法。扎刺法和顯微注射法的針頭相近，但更細(xì)，為0.5mm。其操作過(guò)程是先將胚胎放在含有目的基因的培養(yǎng)液里，然后用細(xì)針扎到細(xì)胞或細(xì)胞核里，針快速拔出，此時(shí)外源基因就進(jìn)入細(xì)胞核，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的流動(dòng)性隨之而關(guān)閉，胚胎內(nèi)進(jìn)入的溶液很少。這種操作比顯微注射快，對(duì)胚胎損害小，但轉(zhuǎn)基因頻率低。

1．3精子載體法:將精子與目的基因共育，在一定條件下使精子攜帶外源基因并進(jìn)行人工授精，這樣可將外源基因?qū)�入。這是轉(zhuǎn)基因方法的重要突破，此法簡(jiǎn)便易行。但大多數(shù)研究表明，外源DNA吸附在精子表面或存在于細(xì)胞質(zhì)中，不能整合到染色體上。但最近意大利科學(xué)家將克隆的目的基因與成熟的小鼠精子在緩沖液中孵育15min后，精子捕獲了目的DNA。后來(lái)研究證明，用精子作為載體，外源基因必須有構(gòu)型，才能被精子攜帶。目前，精子攜帶外源基因的機(jī)理正不斷被揭示［2］。Sperandio等（1996）運(yùn)用精子載體攜帶Psv2CAT基因，通過(guò)人工授精，得到82只仔豬，經(jīng)檢測(cè)獲得5只轉(zhuǎn)基因仔豬。新疆畜牧科學(xué)院綿羊中心農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)用精子載體法得到145只仔豬中，8只為轉(zhuǎn)基因豬［3］。

1．4逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法:RNA病毒感染宿主細(xì)胞后，反轉(zhuǎn)錄成相應(yīng)的DNA，并整合到宿主細(xì)胞的染色體DNA上，得到轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。有人用人工組裝的反轉(zhuǎn)錄病毒來(lái)感染小鼠的8細(xì)胞期或囊胚期胚胎，得到轉(zhuǎn)基因鼠�，F(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)家禽至少有3種反轉(zhuǎn)錄病毒可以作為載體來(lái)獲得轉(zhuǎn)基因雞，但仍未見(jiàn)到帶有目的基因的反轉(zhuǎn)錄病毒直接感染產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因家畜的例子。
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